乌蕨抗有机磷类神经毒剂的药理学研究

乌蕨总黄酮最佳提取工艺
乌蕨总黄酮最佳提取工艺A2 B1 C3 D3。即用20倍量75％乙醇超声提取6次，每次20分钟。经验证试验该工艺稳定性好，总黄酮的提取率高，优于其他方法。
乌蕨简介
鳞始蕨科乌蕨属植物乌蕨(Stenoloma chusanum(L) China)，主要分布于我国长江以南各地，性苦、寒，具有清热解毒和利尿功效，主要用于感冒发烧、咳嗽、扁桃体炎、腮腺炎、农药中毒等治疗。黔南州少数民族常用该草药，治疗外伤感染。对黔南产乌蕨的丙酮、水、酒精的提取物进行活性试验，发现丙酮提取物具有较好的抑菌活性。从酒精提取物的乙酸乙酯萃取物(此部分的成分经薄层层析显示与丙酮提取物的大部分成分一致)中分离纯化3种化合物，其结构分别是：芹菜素、丁香酸、原儿茶酸。
乌蕨三种主要成分的分离提取步骤
1．提取和分离
13．5 kg乌蕨(干品)经75％酒精室温浸提3次，减压回收酒精，所得浸膏经适量水分配后，用乙酸乙酯萃取3次，回收溶剂得到萃取物158 g。取其萃取物50 g，以CHC131／2丙酮1／2MeOH为洗脱溶剂，进行反复硅胶柱层析，得到3个成分，即化合物(1)，(2)和(3)。
2．结构鉴定
化合物(1)：淡黄色固体(甲醇作溶剂)；EI／MS：270[M+]，253，242[M 一CO]，213，153，124。 HNMR (pyridine—d5)813．80(br．s，1 H，一OH)，12．90(w，2 H，一OH)，7．91(d，J=8．4 Hz，2H)，7．22(d，J=8．8 Hz，2 H)，6．92(s，1 H)，6．81(d，J=1．6 Hz，1 H)，6．75(d，J=2．0 Hz，1 H)；”CNMR(pyridine—d5)8182．8(CO)，165．9(s)，164．5(s)，163．2(s)，162．7(s)，158．5(s)，129．0(d)，129．0(d)，122．3(s)，1 16．9(d)，1 16．9(d)，105．0(s)，103．9(d)，100．0(d)，94．9(d)。
以上光谱数据和文献[5]报道的芹菜素的数据基本一致，故化合物(1)确定为芹菜素。
化合物(2)：无色针晶(甲醇)，EI／MS：198(M )，183，155，127。 HNMR (acetone—d6)88．02(W，1 H，OH)，7．31(s，2 H，Ar—H)，3．87(s，6 H，一OMe×2)； CNMR(acetone—d6)8167．5(s)，148．2(s)，148．2(s)，141．5(s)，121．4(s)，108．0(d)，108．0(d)，56．6(q)×2。
以上数据与丁香酸的文献 报道值基本一致，故该化合物为丁香酸。
化合物(3)：无色片晶(丙酮)，EI／MS：154[M ]，137[M 一OH]，109[M 一COOH]。 HNMR(acetone—d6)8 7．51(d，J=1．6 Hz，1 H)，7．46(dd，J= 1．6，8．4 Hz，1H)，6．87(d，J=8．4 Hz，1 H)；13CNMR(acetone—d6)8168．0(s)，150．7(s)，145．5(s)，123．6(d)，117．4(d)，115．7(d)。
以上数据与原儿茶酸的文献 报道值基本一致，TLC显示其Rf值与对照品原儿茶酸一致，故该化合物为原儿茶酸。